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武漢細胞培養(yǎng)用血清廠家

來源: 發(fā)布時間:2023-08-29

胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機抽氣口上。打開壓縮機,用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內(nèi)的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人或獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。武漢細胞培養(yǎng)用血清廠家

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胎牛血清在細胞培養(yǎng)中的作用:1.提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。7.參與細胞凍存。在細胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,應(yīng)依據(jù)文獻報導(dǎo),或細胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定較佳濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲存,運輸應(yīng)干冰冷鏈運輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。武漢細胞培養(yǎng)用血清廠家我們常會看到胎牛血清的標注上有對產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的。

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如何區(qū)別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,從采的血、冷凍、運輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。澄清度,進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。

胎牛血清:胎牛血清是通過母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采的血獲得的新鮮胎牛全血,經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級0.1μm終端微濾方法處理后,常用于細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗。胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。胎牛血清能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

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如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術(shù)指標,1、內(nèi)的毒性,標準為不高于5EU/ml。內(nèi)的毒性是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內(nèi)的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內(nèi)的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍??梢?,內(nèi)的毒性含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量極高,預(yù)示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。胎牛血清在水浴過程中,胎牛血清的液面要完全浸在水中。武漢細胞培養(yǎng)用血清廠家

透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進行加工的。武漢細胞培養(yǎng)用血清廠家

胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內(nèi)生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。武漢細胞培養(yǎng)用血清廠家

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