血清的保存應(yīng)該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化。衢州細胞培養(yǎng)用胎牛血清品牌
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進細胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導(dǎo)細胞發(fā)生分化的作用。合肥無外泌體血清多少錢每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
為何血清會存在批間差?如何避免此影響?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響,XP建議先進行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預(yù)防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預(yù)防措施與建議:因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。
血清的主要作用:對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被較廣用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝醫(yī)治中起重要作用,如SeO3,硒等。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝醫(yī)治中起重要作用。
較為低血清試驗的要求。內(nèi)有毒的檢測:內(nèi)有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上,內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動物體內(nèi),內(nèi)有毒的能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導(dǎo)炎癥反應(yīng);細胞培養(yǎng)中,內(nèi)有毒的能夠誘導(dǎo)細胞反應(yīng)異常。通常,采用鱟阿米巴樣細胞裂解實驗(LAL檢測)檢測內(nèi)有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對內(nèi)有毒的非常靈敏,在微量內(nèi)有毒的存在情況下就凝結(jié)。阿米巴樣細胞相當(dāng)于哺乳動物的白細胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活。與胎牛血清的其它加工方式一樣,熱鈍化處理過程必須小心謹慎,因為血清中的生長因子容易在較高溫度或者較長時間加熱條件下失活,甚至產(chǎn)生沉淀。胎牛血清提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。合肥無外泌體血清多少錢
胎牛血清有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。衢州細胞培養(yǎng)用胎牛血清品牌
胎牛血清用于細胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國外起步較早,認識也較深入。應(yīng)該說,胎牛血清在細胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢。因為其營養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細胞生長,每種細胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時,要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細胞的生長和狀態(tài)。衢州細胞培養(yǎng)用胎牛血清品牌