胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國(guó)外起步較早,認(rèn)識(shí)也較深入。應(yīng)該說,胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢(shì)。因?yàn)槠錉I(yíng)養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細(xì)胞生長(zhǎng),每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細(xì)胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動(dòng),有時(shí)甚至波動(dòng)較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時(shí),要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時(shí),要注意觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和狀態(tài)。含抗體的血清可作為預(yù)防或醫(yī)治疾病之用。金華特級(jí)胎牛血清品牌
血清的常見問題:保存方法,血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物:解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。金華特級(jí)胎牛血清品牌使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。
血清的保存應(yīng)該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物明顯增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量,補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的血清?原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清,對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用所用特級(jí)胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細(xì)胞種類不同,我們建議客戶購(gòu)買前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠?,通過篩選得到滿意的血清批號(hào),之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨,以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來的影響。如何正確保存血清:需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過1個(gè)月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。血清的主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?根據(jù)牛出生時(shí)間和血清采集分離方法分為:胎牛血清:胎牛血清是指懷孕3-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺后,通過一系列工藝處理較為終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會(huì)自動(dòng)消失。新生牛血清:出生14小時(shí)內(nèi)未進(jìn)食的新生牛,通常采用頸動(dòng)脈采集血液分離得到的血清。小牛血清:出生后3天至6月齡小牛動(dòng)脈分離血清。成年牛血清指的是屠宰時(shí)收集全血后分離得到血清。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。南京標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清供應(yīng)商
血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。金華特級(jí)胎牛血清品牌
多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗(yàn)中,通過加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體,以避免對(duì)免疫試驗(yàn)的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會(huì)真正干預(yù)免疫試驗(yàn)。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長(zhǎng)因子的活性衰減,進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。金華特級(jí)胎牛血清品牌