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來源: 發(fā)布時間:2024-01-23

(c)漂洗液,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜、玻璃纖維膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種。 使用本發(fā)明的試劑盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,離心分離土壤和上清液,上清液加入結(jié)合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分離硅基DNA吸附材料和液體,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,烘干,土壤DNA提取保證質(zhì)量——益啟生物公司。普陀區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取銷售

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les using SPINeasy DNA Kit for Soil:M: 1kb plus DNA ladder、Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、Lane 3: Flowerbed soil、Lane 4: Saline soil 、L ane 5: Desert soil。結(jié)論:采用SPINeasy DNA Kit for Soil提取多種類型土壤基因組DNA,電泳條帶清晰,無彌散。3.提取不同類型土壤基因組DNA進(jìn)行PCR結(jié)果。Figure 2: PCR amplification of 16S rRNA gene from different soil samples using SPINeasy DNA Kit for Soil:Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、M: 1kb plus DN上海土壤DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系方式質(zhì)量有保障的土壤DNA提取在哪里買您知道嗎?

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PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,

。如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細(xì)胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次?!?】減少樣本用量。問題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)?!は礈觳桓蓛簦涸黾酉礈齑螖?shù)。問題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加上海益啟生物公司是有授權(quán)的土壤DNA提取公司嗎?

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.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結(jié)果,有機(jī)營養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自動化提?。籐ane5-8:手工提?。籐ane 1&5: 100mg有機(jī)營養(yǎng)土;Lane 2&6: 100mg花壇土;Lane 3&7: 250mg鹽堿土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同類型土壤DNA進(jìn)行PCR及酶切結(jié)果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有機(jī)營養(yǎng)土;Lane 2:花壇土;Lane 3:鹽堿土;Lane 4土壤DNA提取保證正規(guī)產(chǎn)品——益啟生物公司。上海土壤DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系方式

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入RAase消化。問題7:A260/A230比值低怎么辦?解決思路:·A230是多肽、芳香基團(tuán)、苯酚和一些碳?xì)浠衔锏奈舛龋珹230高表示樣品中存在一些污染物?!?】蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)。【2】雜質(zhì)去除不干凈:洗脫之前,核酸吸附柱中盡可能不要殘留液體,可增加空離心次數(shù)和時間。問題8:提取的DNA出現(xiàn)降解怎么辦?解決思路:·優(yōu)化裂解條件,避免過度裂解,降低物理破碎的力度·操作過程中是否有污染DAase,造成DNA降解普陀區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取銷售

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