提供的超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)***處理的,同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的??稍趯?shí)驗(yàn)前通過先用0.5M NaOH預(yù)清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng),對(duì)于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾濃縮管零售多少錢呢?黃浦區(qū)默克2ml超濾濃縮管訂購(gòu)
濃度:當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時(shí),通量通常不受濃度影響。操作過 程中,隨著溶質(zhì)濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。 溫度:粗體,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時(shí)的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴(kuò)散率增加 3-3.5%,同時(shí)溶液粘度降低。 實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來操作。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu),蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會(huì)沉淀,產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會(huì) 在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中,形成結(jié)晶和沉淀。上海默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系電話超濾濃縮管的優(yōu)缺點(diǎn)您知道嗎?
這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對(duì)蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長(zhǎng),多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡(jiǎn)化往往帶來更好的結(jié)果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化,數(shù)據(jù)結(jié)果便于評(píng)估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時(shí)節(jié)省過濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見,實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí),需要謹(jǐn)慎地選擇合適的 NMWL膜和設(shè)備。雖然影響因素較多,我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時(shí)節(jié)省過濾時(shí)間。超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì),滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產(chǎn)物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管,沒有死體積,用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實(shí)際應(yīng)用中還常用于大分子與其它分子的分 離,比如蛋白酶切后的處理及藥物結(jié)合率分析等等。超濾濃縮管的系列有很多種。上海默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系電話
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Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而精細(xì),蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測(cè)試,所以無法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì),不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。黃浦區(qū)默克2ml超濾濃縮管訂購(gòu)