截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多，從而導(dǎo)致排阻增加。比如，有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化，而另一些則發(fā)生解聚（如血紅素蛋白）成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn)，我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先，再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。虹口區(qū)Merck離心濃縮管規(guī)格

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間，也可參考Amicon? Pro完整操作說(shuō)明書(shū) 查看詳細(xì)信息。靜安區(qū)Merck離心濃縮管哪家優(yōu)惠超濾濃縮管具體報(bào)價(jià)多少呢。

默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì) 一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物，抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品， Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn) 化，并滿足下游各種應(yīng)用的要求，使研究者處理樣品時(shí)倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)： 有效濃縮同時(shí)保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設(shè)計(jì) ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計(jì)和控制樣品濃縮倍數(shù) ?重復(fù)性好，便于樣品數(shù)據(jù)相互比較

***的化學(xué)兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝，避免使用膠水 帶來(lái)的化學(xué)溶出對(duì)樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩(wěn)定，化學(xué) 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應(yīng)用（提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考） Amicon? Ultra 離心超濾管： ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質(zhì)的濃縮 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標(biāo)志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設(shè)計(jì)精巧、緊湊，一體化結(jié)構(gòu)確保不會(huì)發(fā)生滲漏，即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩(wěn)定，數(shù)據(jù)平行性、重現(xiàn)性好，適合精細(xì)操作和 高通量操作超濾濃縮管的主要優(yōu)勢(shì)是什么。

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書(shū)。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn)，相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的工具解決外泌體制備的高大上問(wèn)題，真是惠而不費(fèi)，不亦樂(lè)乎？上海超濾濃縮管銷售公司。楊浦區(qū)濃縮管批發(fā)

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蛋白如果濃縮過(guò)快或者過(guò)度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過(guò) 20mg/ml。對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進(jìn)方法是： 1）離心力降為推薦離心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10k，此時(shí)可以選擇30k） 3）在濃縮過(guò)程中取出超濾管，用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況，請(qǐng)先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用，如暫時(shí)不用，請(qǐng)保持潤(rùn)濕狀態(tài)，避免重新干燥。虹口區(qū)Merck離心濃縮管規(guī)格