(c)漂洗液,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜、玻璃纖維膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種。 使用本發(fā)明的試劑盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,離心分離土壤和上清液,上清液加入結(jié)合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分離硅基DNA吸附材料和液體,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,烘干,高質(zhì)量的土壤DNA提取,保證您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。靜安區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取咨詢問(wèn)價(jià)
顆粒緊密結(jié)合,很難分離,經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致菌體裂解不完全,DNA條帶彌散;并且土壤中還存在大量抑制劑,如腐殖酸等,導(dǎo)致提取的DNA純度差,洗脫液有顏色。這些難題,選擇MP Biomedicals***產(chǎn)品土壤基因組DNA提取試劑盒——SPINeasy DNA Kit for Soil,幫你輕松解決,讓我們看看TA到底有什么神奇之處吧……1.四大絕招攻克土壤樣本DNA提取難題。產(chǎn)品名稱:SPINeasy DNA Kit for Soil、SPINeasy DNA Kit for Soil (Sample) 5 preps。包裝規(guī)格:50 preps、5p江蘇土壤微生物DNA土壤DNA提取哪家好益啟生物提供專業(yè)的土壤DNA提取。
樣本,5-6m/s,研磨20-40s,難裂解樣本研磨2個(gè)循環(huán),增加研磨力度,提取按土壤試劑盒提取protocol進(jìn)行?!ぽ^軟的樣本,仍然可以采用介質(zhì)E,提高裂解的劇烈程度,增加研磨速度和時(shí)間,增加研磨次數(shù)。不僅如此,我們還有文獻(xiàn)支持。參考文獻(xiàn)1:·樣本類型:葡萄枝·樣本粉碎:使用液氮和攪拌機(jī)將植物材料在無(wú)菌鋼瓶中粉碎。·樣本裂解:FastPrep-24TM 5G,介質(zhì)E裂解?!颖綝NA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取?!は掠螌?shí)驗(yàn):細(xì)菌16S rD
(a)土壤裂解液,其組成成分包括表面活性劑、螯合劑、pH緩沖劑; 所述表面活性劑為:十二烷基硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉、月桂?;“彼徕c、聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40、十六烷基三甲基溴化銨中的一種或兩種及以上的混合,所述表面活性劑的質(zhì)量濃度為1-100g/L,推薦的表面活性劑成分是十二烷基硫酸鈉或十二烷基磺酸鈉中的一種或兩種的混合,推薦的表面活性劑質(zhì)量濃度為1-10g/L; 所述螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸三鉀中的一種或兩種,所述離液鹽的濃度為1-100 mmol/L;上海益啟生物的土壤DNA提取價(jià)格區(qū)間大概是多少?
12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,土壤DNA提取上海授權(quán)代理商——上海益啟生物科技有限公司。靜安區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取咨詢問(wèn)價(jià)
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實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有沒(méi)有遇到過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況,提取DNA的純度過(guò)低、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問(wèn)題,以及MP技術(shù)人員給出的解決方案,希望可以幫到大家,在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問(wèn)題1:土壤樣品含水量過(guò)高怎么辦?解決思路:· 如果土壤樣品過(guò)濕,可先將樣本10,000 x g,離心30s,盡可能多的去除液體。問(wèn)題2:DNA產(chǎn)量低怎么辦?解決思路:· 樣本微生物含量低:【1】增加樣本量【2】靜安區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取咨詢問(wèn)價(jià)